實時熒光定量PCR儀
實時熒光定量PCR儀
熒光定量PCR(FluorescenceQuantitivePolymeraseChainReaction,又稱實時熒光定量PCR(realtime-PCR),是基于熒光共振能量傳遞技術(Fluorescenceresonanceenergytransfer,FRET),受體熒光染料發(fā)射出的熒光訊號強度與DNA產(chǎn)量成正比,檢測PCR過程的熒光訊號便可得知靶序列初始濃度。
主要用途
1. DNA 或RNA 的絕對定量分析:包括病原微生物或病毒含量的檢測,轉基因動植物轉基因拷貝數(shù)的檢測,臨床疾病診斷等。
2. 基因表達差異分析:例如比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學處理等 ),特定基因在不同時相的表達差異以及cDNA 芯片或差顯結果的確證。
3. 基因分型:例如SNP 檢測,甲基化檢測等。
主要優(yōu)點
1、高靈敏性 可檢測單個細胞基因;
2、高特異性和精確性 將DNA雜交的高特異性和光譜技術的高精準性融合,應用熒光探針和光電傳導,直接探測基因擴增過程中熒光信號的變化,以獲得定量結果,相當于在PCR反應過程中自動完成了Northern雜交;
3、操作簡便、速度快 通過計算機和分析軟件實現(xiàn)PCR擴增、產(chǎn)物檢測和定量分析一體化;
4、安全、無污染 FQ-PCR在全封閉狀態(tài)下進行PCR擴增和產(chǎn)物分析,杜絕了傳統(tǒng)PCR開放檢測對環(huán)境的污染和由此導致的假陽性;
5、結果觀測重復性好 一起在線實時觀測,結果判斷直觀,避免人為因素干擾。
各型肝炎、艾滋病、禽流感、結核、性病等傳染病診斷和療效評價;地中海貧血、血友病、性別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)育檢測;腫瘤標志物及瘤基因檢測實現(xiàn)腫瘤病診斷;遺傳基因檢測實現(xiàn)遺傳病診斷。