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醫(yī)學(xué)檢驗科開展艱難梭菌及其毒素檢測

發(fā)布時間:2021-09-23 本文來源:醫(yī)學(xué)檢驗科

艱難梭菌是革蘭陽性厭氧產(chǎn)芽孢桿菌,其孢子在環(huán)境中可存活數(shù)月乃至更長的時間,是醫(yī)院內(nèi)感染和抗生素相關(guān)性腹瀉最常見病原菌之一。艱難梭菌主要通過糞-口途徑傳播,大多數(shù)產(chǎn)毒株因產(chǎn)生毒素A(腸毒素)和毒素B(細(xì)胞毒素)而致病,兩種毒素分別由兩個獨(dú)立的基因tcdA和tcdB編碼。毒素A導(dǎo)致消化道內(nèi)液體分泌增加、黏膜炎癥和結(jié)構(gòu)損壞。毒素B通過干擾蛋白質(zhì)的活性,調(diào)節(jié)肌動蛋白聚合,從而導(dǎo)致細(xì)胞骨架破壞其毒力在胃腸道內(nèi)的濃度幾乎是毒素A的10倍,是導(dǎo)致感染的主要原因。一般情況下,艱難梭菌感染(Clostridium difficile infection, CDI)患者的惡化程度會因毒素量的增加而加重。

近年,CDI在發(fā)病率、嚴(yán)重程度和復(fù)發(fā)率都呈不斷上升的趨勢,2013年美國已將艱難梭菌與耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐萬古霉素腸球菌感染作為三大醫(yī)院獲得性感染的主要病原菌。在免疫力低下、住院時間長、抗菌藥物使用強(qiáng)度大的腫瘤病人中,CDI尤其應(yīng)受到重視。CDI的臨床表現(xiàn)呈現(xiàn)多樣性,從輕、中度腹瀉到暴發(fā)性甚至致命性偽膜性結(jié)腸炎、中毒性巨結(jié)腸、腸穿孔、敗血癥。嚴(yán)重感染者須行腸切除,甚至死亡。

CDI的診斷須結(jié)合臨床和實驗室檢查,患者存在腹瀉癥狀,且24h內(nèi)腹瀉3次或3次以上,并滿足以下任一條件:(1)糞檢出產(chǎn)毒性艱難梭菌或毒素陽性;(2)結(jié)腸鏡或組織病理學(xué)示偽膜性結(jié)腸炎。

為了給臨床診斷艱難梭菌感染提供更加準(zhǔn)確的依據(jù),便于及時治療,醫(yī)學(xué)檢驗科于近期開展了糞便標(biāo)本艱難梭菌毒素檢測,樣本隨到隨檢,2h內(nèi)報告。

檢測原理:

通過酶聯(lián)免疫層析法檢測艱難梭菌抗原和毒素。試劑盒在單一反應(yīng)孔中使用特異性抗體同時檢測疑似感染艱難梭菌病人糞便中艱難梭菌谷氨酸脫氫酶抗原和毒素,前者作為艱難梭菌的篩選試驗,后者檢測是否存在毒素A和毒素B證實存在艱難梭菌有毒株。

標(biāo)本采集及要求:

1)標(biāo)本:糞便

2)量:固體便>2g(蠶豆大小);水樣便>1ml。

3)容器:普通糞便標(biāo)本盒

4)送檢時間和要求:新鮮糞便,1小時之內(nèi)送檢。

檢驗結(jié)果及解釋:

谷氨酸脫氫酶(GDH):陰性  未檢測到艱難梭菌

谷氨酸脫氫酶(GDH):陽性  艱難梭菌毒素A&B:陰性  檢測到艱難梭菌但未檢測到毒素

谷氨酸脫氫酶(GDH):陽性  艱難梭菌毒素A&B:陽性  檢測到產(chǎn)AB毒素的艱難梭菌

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