一、結(jié)核病基本介紹
    結(jié)核病是我國最常見的傳染病之一，其致死率高，由結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群引起的慢性傳染性疾病，可累及全身各個(gè)器官，以肺結(jié)核最為多見。結(jié)核分枝桿菌主要是經(jīng)空氣傳播，大多數(shù)人在感染結(jié)核分枝桿菌后并無癥狀，稱為潛伏感染。潛伏感染可持續(xù)幾十年，僅有5%—10%的潛伏感染者發(fā)展為活動(dòng)性肺結(jié)核。
    有數(shù)據(jù)顯示，我國結(jié)核分支桿菌的攜帶者超過5億人，每年因患結(jié)核病死亡的人數(shù)高達(dá)13萬。如何有效地診治結(jié)核病是我們?nèi)粘ＥR床工作面臨的一個(gè)重要課題。
    二、結(jié)核病診斷技術(shù)進(jìn)展
    l  結(jié)核病診斷：抗酸染色涂片：痰涂片靈敏度差，且存在標(biāo)本獲取的問題。
    l  培養(yǎng)：培養(yǎng)所需時(shí)間長，不能滿足快速診斷的需要
    l  結(jié)核分枝桿菌γ干擾素釋放實(shí)驗(yàn)：能區(qū)分結(jié)核分枝桿菌感染和卡介苗接種，適用于卡介苗廣泛接種的地區(qū)， 區(qū)別不了活動(dòng)性結(jié)核病與潛伏性結(jié)核感染。
    l  分子診斷技術(shù)：結(jié)核分枝桿菌特異性核酸擴(kuò)增技術(shù) 
    作為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手段之一的熒光PCR方法，由于其敏感性高、特異性強(qiáng)和反應(yīng)迅速，操作簡便、省時(shí)等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用在生物和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域；
    近年隨著其技術(shù)的不斷完善和改進(jìn)，也逐步應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、特別是對(duì)病原微生物的臨床檢查方面。對(duì)標(biāo)本的純度要求低：不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、細(xì)胞、活檢組織等。
    三、分子檢測方法優(yōu)勢
    熒光PCR的敏感性很高，一般可以檢測出1～100fg純化的結(jié)核桿菌DNA，相當(dāng)于1～20個(gè)結(jié)核桿菌，這種敏感性明顯高于涂片法和培養(yǎng)法。
    熒光PCR還可以檢出培養(yǎng)法易發(fā)生失敗的病例，從而大大提高菌陰結(jié)核病的診斷。 同時(shí)也不受抗癆治療的影響，可以準(zhǔn)確觀察抗癆治療的效果，防止血清學(xué)方法所帶來的假陰性結(jié)果。
    四、熒光PCR檢測TB的臨床意義
    ü  1.能早期診斷TB菌血癥:在TB感染的早期，PCR就能給于擴(kuò)增并確診。
    ü  2.時(shí)間短，敏感性和特異性高;PCR檢測TB僅需2-4h對(duì)于某些培養(yǎng)法難以實(shí)施的病例，PCR法則行之有效，同時(shí)提高了敏感性和特異性，可以檢測到1個(gè)TB菌。
    ü  3.有利于鑒別診斷。
    ü  4.抗癆治療的評(píng)價(jià):PCR法則可以通過定期檢測，采用定量PCR法確切地評(píng)價(jià)抗癆藥物的療效，可以定量。
    五、可用標(biāo)本
    血液、體腔液、洗嗽液、細(xì)胞、活檢組織等。